医生首次在鼻咽癌患者中发现循环肿瘤细胞与EB病毒激活状态间的关系


导语:EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)被证实与越来越多的恶性肿瘤相关而受到人们的关注,目前鼻咽癌循环肿瘤细胞(Circulating tumor cell,CTC)的研究及其临床意义并不明确,本文中研究人员使用CTCBIOPSY®平台分离CTC,并结合下游生物学技术探讨了鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者中CTC与EBV之间的关系


背景介绍:

   鼻咽癌是头颈癌中最常见的恶性肿瘤,CTC作为一个在多数肿瘤中极有潜力的预后指标,目前在鼻咽癌中的研究却非常少。EBV(Epstein-Barr virus)由Epstein和Barr于1964年首次成功建株,又称人类疱疹病毒4型(Human herpesvirus 4,HHV-4),是多种恶性肿瘤(如鼻咽癌)的病因之一,它主要感染人类口咽部的上皮细胞和B淋巴细胞,EBV的激活是鼻咽癌进展中的一个常见事件。本研究使用滤膜分离的方法富集鼻咽癌患者外周血中的CTC,并探讨了鼻咽癌患者中循环肿瘤细胞与EB病毒激活状态间的关系。


研究内容:

   本研究入组了33名未分化型非角化性NPC患者,在患者进行初始治疗前采集5mL静脉血,并使用CTCBIOPSY®平台(芝友医疗)对血样进行分离染色,然后采用细胞形态学原理在光学显微镜下对CTC进行镜检计数,3个以上聚集成团的CTC称为CTM(Circulating tumor microemboli),随后将滤膜上已染色的细胞脱色后进行免疫组织化学染色(Immunohistochemistry,IHC),IHC检测的标志物为CK5/6及P63。EBV 的DNA载量和VCA-IgA(病毒衣壳抗原)、EA-IgA(早期抗原)水平是EBV激活的重要指标。研究人员随后在滤膜上使用原位杂交方法检测了CTC中的EBERs(EBV-encoded RNAs),EBER原位杂交是确定EBV与疾病关系的公认标准方法。在33例鼻咽癌患者中,22例(66.7%)检测出CTC(平均值为2.06)(图1);2例(6.1%)(T3N3M0)检测出CTM,在所有TMN分期的NPC患者中均有CTC检出,CTC检出与TNM分期无显著相关性。CTC的检出和EBV的激活状态相关。在全部NPC患者和未发生远端转移的NPC患者中,CTC阳性患者的EBV的VCA-IgA水平高于CTC阴性患者(全部NPC患者阳性vs.阴性:4.86 vs. 3.88,P=0.016;未发生远端转移的NPC患者阳性vs.阴性:4.95 vs. 3.76,P=0.009 ),CTC的检出数量与EBV的VCA-IgA水平和DNA载量相关。



图1 鼻咽癌患者中CTC检出图
图2 鼻咽癌患者中CTM检出图
图3 鼻咽癌CTC的IHC染色图  
A) CK5/6染色  B) P63染色
图4 鼻咽癌CTM的EBERs原位杂交图

研究结论:

   在不同TNM分期的NPC患者中,CTC和CTM均有较高的检出率,且CTC检出与EBV激活状态有关,CTC检出数量与患者的EBV激活状态呈正相关。使用CTCBIOPSY®平台,结合免疫组化、原位杂交等技术,可以对肿瘤患者外周血中的CTC进行更多的下游生物学研究分析。


本文系中山大学肿瘤防治中心课题组与芝友医疗合作的研究成果!

原始出处:

He C, Huang X, Su X, Tang T, Zhang X, Ma J, et al. The association between circulating tumor cells and Epstein-Barr virus activation in patients with nasopharyngeal carcinoma. Cancer biology & therapy. 2017:0.